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        免疫組化的避免方法
        更新時(shí)間:2015-08-12   點(diǎn)擊次數(shù):713次

         1.二抗與組織中的Ig結(jié)合

        如羊抗兔的二抗,二抗可以標(biāo)本中(人)Ig發(fā)生交叉反應(yīng),科學(xué)上越接近的動(dòng)物,交叉反應(yīng)越明顯,如人與猴,兔與豚鼠。抗體

        避免方法:用與待測(cè)組織相同的5%的正常血清稀釋二抗。如人血清。

        組織中殘存醛基與Ig的結(jié)合

        如醛類固定后未能*的沖洗,殘留醛基可以和Ig結(jié)合。

        2.避免方法:

        (1)*沖洗;

        (2)0.02%的新鮮的硼氧化鉀液處理10分鐘后沖洗。

        3.內(nèi)源性過(guò)氧化物酶

        紅細(xì)胞,粒細(xì)胞的含量尤其高,鏡下可以識(shí)別,不要將其當(dāng)成陽(yáng)性結(jié)果。

        避免方法:

        (1)石蠟切片 0.3%雙氧水-甲醇溶液處理切片;

        (2)冰凍切片 3%雙氧水處理切片5分鐘(99:1)因?yàn)槲唇?jīng)固定包埋,大部分酶未被破壞;

        (3)對(duì)于骨髓涂片 用非過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體

        4.內(nèi)源性生物素

        以 24mg/ml的卵白素封片15分鐘。

        5.交叉反應(yīng)

        PcAb敏感性高,但特異性稍低,容易出現(xiàn)非特異性染色。

        避免方法:

        (1)盡可能稀釋抗體

        (2)盡可能用McAb。

         

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