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        RNA電泳液
        更新時(shí)間:2013-06-27   點(diǎn)擊次數(shù):1306次

        RNA電泳液
        產(chǎn)品及特點(diǎn)
        本產(chǎn)品是預(yù)配的10 X RNA電泳液(即10 X MOPS電泳液),專門用于
        RNA電泳分析。
        1. 即開即用,用戶不需要自己進(jìn)行RNase滅活、高壓滅菌、pH調(diào)節(jié)等操作。
        2. 與Northern雜交等后續(xù)反應(yīng)兼容。
        規(guī)格及成分
        成 份
        100 mL包裝
        (3150-100)
        RNARUN 100 mL
        使用手冊 1份

        運(yùn)輸及保存 常溫運(yùn)輸,4℃保存。
        自備試劑 瓊脂糖、37%甲醛、EB (10 mg/mL)、去離子甲酰胺。
        使用方法
        一、用本產(chǎn)品配制瓊脂糖甲醛變性膠(1.2%, 100 mL)
        1. 在三角瓶中加入下列成份:
        瓊脂糖 1.2 g
        DEPC水 87 mL
        2. 將瓊脂糖加熱融化后,加入10 mL本產(chǎn)品。
        3. 待膠冷卻至60 °C左右,再加下列成份:
        37%甲醛 3.0 mL
        EB (10 mg/mL) 2-4 μL
        4. 混勻后倒膠, 凝固半小時(shí)后即可以使用瓊脂糖甲醛變性膠(需要量
        RNA變性上樣液和RNA電泳液)。

        二、用本產(chǎn)品配制RNA變性上樣液(以一個(gè)RNA樣品為例)
        本產(chǎn)品 2.0 μL
        37%甲醛 3.5 μL
        去離子甲酰胺 10.0 μL
        RNA樣品 4.5 μl
        于85° 變性10 min,冰浴冷卻5分鐘后加上樣液(可以使用普通的6
        X DNA上樣液)后直接上樣。

        三、用本產(chǎn)品配制RNA電泳液
        將本產(chǎn)品用無RNase的水稀釋十倍后即可直接用于RNA的瓊脂糖甲醛
        變性膠使用。

        四、電泳條件
        電泳時(shí),將凝膠預(yù)電泳5 min(電壓為5 V/cm)。隨后加樣品和分子
        量對(duì)照(如果有的話),以 3-4 V/cm 的電壓電泳,直至溴酚藍(lán)遷移至
        膠下游的3/4處。電泳結(jié)束后,在紫外燈下拍照。

        【注意事項(xiàng)】
        每一泳道至多可分析 30 μg RNA,通常用 10-20 μg 總 RNA 進(jìn)行
        Northern雜交,可以檢測高豐度mRNA(占mRNA總量的0.1%以上);
        如待測RNA含量極微,每個(gè)泳道需加0.5-3.0 μg poly(A)+ RNA。
        溴酚藍(lán)泳動(dòng)速度相當(dāng)于300bp DNA,二甲苯青FF泳動(dòng)速度相當(dāng)于4
        Kp DNA。

         

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