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        檸檬酸(CA)含量測定樣本的前處理
        更新時間:2021-08-26   點擊次數(shù):945次

        檸檬酸(CA)含量測定樣本的前處理:

        組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

        ①稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)菌或細(xì)胞,加入1mL試劑一和10uL?試劑三,用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。

        ②將勻漿600g,4℃離心5min。

        ③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。

        ④上清液即胞漿提取物,可用于測定從線粒體泄漏的α-KGDH(此步可選做)。

        ⑤在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL?試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),用于線粒體α-KGDH活性測定。

        測定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+?和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和?NADH,NADH在340?nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實驗用品及儀器:紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

        雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體

        鋅指結(jié)構(gòu)蛋白酶20抗體

        C型凝集素受體CLEC13A抗體

        雙甲基精氨酸水解酶2抗體

        D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體

        雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶3抗體

        肌營養(yǎng)蛋白α抗體

        多巴胺β羥化酶抗體

        抑癌基因抗體

        DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體

        DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體

        DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體

        死亡受體3抗體

        死亡受體4抗體

        精神分裂癥易感基因抗體

        蓬亂蛋白1抗體

        異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體

        結(jié)蛋白抗體

        DISC1 C端抗體

        DISC1 N端抗體

        多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體

        結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體

        多巴胺脫羧酶抗體

        防御素β1/Defensin β1抗體

        DLX4抗體

        DTX1抗體

        絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體


         

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